CRISPR-RNA 等溫快速擴增凍干球（熒光型）
本試劑盒利用高敏恒溫擴增（H-SIA）以及 CRISPR/Cas（基因編輯核酸檢測技術）開 展核酸檢測。 首先對核酸樣本進行高敏恒溫擴增（H-SIA），然后向擴增產物中加入 CRISPR 反應體 系并進行恒溫檢測。若反應體系中的 crRNA(序列中含有與 Cas 蛋白結合的回文序列和與目 的基因序列互補的特異序列)識別到擴增產物中的目的基因序列，則激活 Cas 蛋白的切割活 性，剪切反應體系中的報
1.產品名稱 CRISPR-RNA 等溫快速擴增凍干球（熒光型）
2.原理概述 本試劑盒利用高敏恒溫擴增（H-SIA）以及 CRISPR/Cas（基因編輯核酸檢測技術）開 展核酸檢測。 首先對核酸樣本進行高敏恒溫擴增（H-SIA），然后向擴增產物中加入 CRISPR 反應體 系并進行恒溫檢測。若反應體系中的 crRNA(序列中含有與 Cas 蛋白結合的回文序列和與目 的基因序列互補的特異序列)識別到擴增產物中的目的基因序列，則激活 Cas 蛋白的切割活 性，剪切反應體系中的報告 RNA，報告 RNA 被剪切后會發出熒光被儀器檢測出熒光信號； 若擴增產物不含目的基因序列，則不激活 Cas 蛋白，報告 RNA 不被剪切，無熒光信號被采 集。
3.主要組成成分
4.產品特點 4.1 外觀：試劑盒包裝完整，模板稀釋液無漏液。 4.2 檢測下限：檢測自建體系性能達到 100 copy/mL。不同體系檢測性能會略有差異。 4.3 重復性：試劑檢測同一樣本 10 次，結果均一致。
5.有效期 2-8℃避光下有效期為 12 個月。28±2℃避光保存下有效期為 3 個月。
6.檢測方法
6.1 準備模板：采用模板稀釋液按照試驗要求稀釋模板。
6.2 H-SIA 等溫擴增：取 1.5 ml 離心管放入 1 顆 H-SIA 球，加入引物探針，加入 45.5 μl 模 （終體積為 50ul），輕彈幾次混勻。后 42℃孵育 20 min。
注：F/R 引物推薦用量：10 μM，各加入 1-2μl； 探針推薦用量：500-1000 ng/T?？筛鶕筮M行調整。
6.3 CRISPR 剪切反應：將 1 個 CRISPR 凍干球放入 8 反應管中，加入 45 ul 水溶解，加入 crRNA，加入 5uL 等溫擴增產物，上下顛倒混勻后離心。后將 8 聯排放于熒光定量 PCR 中， 37℃恒溫反應，30s 采集一次信號（FAM 通道），設置 60 個循環。
注：crRNA 推薦用量：100-500 ng/T?？筛鶕w系進行調整。 檢測通道可根據引物探針不同進行更改。
7.注意事項
7.1 本試劑用于體外檢測，僅供科研使用，使用前請仔細閱讀本說明書。
7.2 本試劑盤應嚴格按照說明書要求儲存，必需在有效期內使用。
7.3 應按說明書嚴格進行操作，請勿混合使用不同批次組分。操作失誤或樣本量過少都有可 能導致檢測結果出現偏差。
7.4 如果試劑盒包裝損壞、有破損、漏氣等，請不要使用該產品。
7.5 試劑袋中的稀釋液、干燥劑不得吞服。稀釋液中含有少量防腐劑，可能對皮膚和眼睛造 成刺激。如果該溶液接觸到皮膚或眼睛，立即用大量清水沖洗。 如發生皮膚刺激或皮疹， 應及時就診。操作時應注意做好安全防護措施，使用前后清洗或消毒雙手。
1.產品名稱 CRISPR-RNA 等溫快速擴增凍干球（熒光型）
2.原理概述 本試劑盒利用高敏恒溫擴增（H-SIA）以及 CRISPR/Cas（基因編輯核酸檢測技術）開 展核酸檢測。 首先對核酸樣本進行高敏恒溫擴增（H-SIA），然后向擴增產物中加入 CRISPR 反應體 系并進行恒溫檢測。若反應體系中的 crRNA(序列中含有與 Cas 蛋白結合的回文序列和與目 的基因序列互補的特異序列)識別到擴增產物中的目的基因序列，則激活 Cas 蛋白的切割活 性，剪切反應體系中的報告 RNA，報告 RNA 被剪切后會發出熒光被儀器檢測出熒光信號； 若擴增產物不含目的基因序列，則不激活 Cas 蛋白，報告 RNA 不被剪切，無熒光信號被采 集。
3.主要組成成分
4.產品特點 4.1 外觀：試劑盒包裝完整，模板稀釋液無漏液。 4.2 檢測下限：檢測自建體系性能達到 100 copy/mL。不同體系檢測性能會略有差異。 4.3 重復性：試劑檢測同一樣本 10 次，結果均一致。
5.有效期 2-8℃避光下有效期為 12 個月。28±2℃避光保存下有效期為 3 個月。
6.檢測方法
6.1 準備模板：采用模板稀釋液按照試驗要求稀釋模板。
6.2 H-SIA 等溫擴增：取 1.5 ml 離心管放入 1 顆 H-SIA 球，加入引物探針，加入 45.5 μl 模 （終體積為 50ul），輕彈幾次混勻。后 42℃孵育 20 min。
注：F/R 引物推薦用量：10 μM，各加入 1-2μl； 探針推薦用量：500-1000 ng/T?？筛鶕筮M行調整。
6.3 CRISPR 剪切反應：將 1 個 CRISPR 凍干球放入 8 反應管中，加入 45 ul 水溶解，加入 crRNA，加入 5uL 等溫擴增產物，上下顛倒混勻后離心。后將 8 聯排放于熒光定量 PCR 中， 37℃恒溫反應，30s 采集一次信號（FAM 通道），設置 60 個循環。
注：crRNA 推薦用量：100-500 ng/T?？筛鶕w系進行調整。 檢測通道可根據引物探針不同進行更改。
7.注意事項
7.1 本試劑用于體外檢測，僅供科研使用，使用前請仔細閱讀本說明書。
7.2 本試劑盤應嚴格按照說明書要求儲存，必需在有效期內使用。
7.3 應按說明書嚴格進行操作，請勿混合使用不同批次組分。操作失誤或樣本量過少都有可 能導致檢測結果出現偏差。
7.4 如果試劑盒包裝損壞、有破損、漏氣等，請不要使用該產品。
7.5 試劑袋中的稀釋液、干燥劑不得吞服。稀釋液中含有少量防腐劑，可能對皮膚和眼睛造 成刺激。如果該溶液接觸到皮膚或眼睛，立即用大量清水沖洗。 如發生皮膚刺激或皮疹， 應及時就診。操作時應注意做好安全防護措施，使用前后清洗或消毒雙手。
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